आरटी-पीसीआर आणि पीसीआर हे एकाच तंत्राचा आणि कोरोनाव्हायरस शोध चाचणीचा संदर्भ देतात. पूर्ण नाव रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पॉलिमरेज चेन रिएक्शन टेस्ट आहे परंतु बहुतेकदा ते फक्त पीसीआर टेस्ट असे संक्षिप्त केले जाते.
हो, RT-PCR आणि PCR ही एकाच चाचणीला संदर्भित करतात. RT-PCR चे पूर्ण रूप रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पॉलिमरेज चेन रिएक्शन आहे. याला सहसा PCR (पॉलिमरेज चेन रिएक्शन) टेस्ट असे संक्षिप्त रूप दिले जाते.
थोडक्यात सांगायचे तर, पीसीआर चाचणीमध्ये विषाणू, बॅक्टेरिया किंवा इतर सूक्ष्मजीवांपासून अनुवांशिक पदार्थ शोधले जातात ज्याला एम्प्लिफिकेशन म्हणतात. आरएनए अनुवांशिक पदार्थ प्रथम रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन (आरटी) नावाच्या प्रक्रियेद्वारे डीएनएमध्ये रूपांतरित केले जातात, म्हणूनच त्याला आरटी-पीसीआर असेही म्हणतात. मुख्य फायदे म्हणजे रोगजनक डीएनए/आरएनएच्या अगदी लहान प्रमाणात देखील मोजता येण्याजोग्या प्रमाणात वेगाने वाढवता येतात.
RT-PCR आणि PCR दोन्ही समान सामान्य कोरोनाव्हायरस शोध चाचणी दर्शवतात जी विषाणूचा अनुवांशिक कोड शोधून कार्य करते. ही सर्वात अचूक COVID-19 पुष्टीकरण चाचणी आहे. ही पद्धत विषाणूजन्य अनुवांशिक सामग्री वाढवते, रुग्णाच्या नमुन्यात असल्यास अद्वितीय विषाणू RNA अनुक्रमांना लक्ष्य करते.
पीसीआर (पॉलिमरेज चेन रिएक्शन) आणि क्यूपीसीआर (क्वांटिटेटिव्ह पीसीआर) मधील महत्त्वाचा फरक म्हणजे:
पीसीआर
- लक्ष्य डीएनए अनुक्रमाची उपस्थिती शोधते
- गुणात्मक चाचणी (डीएनएची उपस्थिती किंवा अनुपस्थिती)
- डीएनएचे प्रमाणन करण्यास परवानगी देत नाही
क्यूपीसीआर
- डीएनए एकाग्रतेचे प्रमाण निश्चित करते
- परिमाणात्मक चाचणी
- अचूक डीएनए पातळी किंवा जनुक अभिव्यक्ती मोजते
- अधिक संवेदनशील आणि अचूक परिमाण
पीसीआरमध्ये, अभिकर्मक संपेपर्यंत डीएनए क्रम घातांकीयरित्या वाढतो, ज्यामुळे क्रम शोधण्यासाठी गुणात्मक सकारात्मक किंवा नकारात्मक परिणाम मिळतो.
qPCR मध्ये, फ्लोरोसेंट टॅग्ज प्रत्येक प्रतिकृती चक्रादरम्यान DNA चे प्रमाणीकरण करण्यास अनुमती देतात. परिणाम म्हणजे अनुक्रम उपस्थितीची गुणात्मक सकारात्मकता नसून अचूक एकाग्रता.
पीसीआर आणि क्यूपीसीआर दोन्ही लक्ष्य डीएनए वाढवतात, तर क्यूपीसीआर तंत्र रिअल टाइममध्ये प्रवर्धन प्रगतीचे निरीक्षण करते. हे अचूक लक्ष्य डीएनए प्रमाणीकरणास अनुमती देते जे जीन अभिव्यक्ती विश्लेषण, सूक्ष्मजीव भार शोधणे इत्यादींसाठी उपयुक्त आहे ज्यासाठी अचूक मोजमाप पातळीची आवश्यकता आहे.
थोडक्यात, गुणाकार डीएनए परंतु क्यूपीसीआर दोन्ही देखील संख्यात्मक परिणामांची आवश्यकता असलेल्या काही अनुप्रयोगांसाठी उपयुक्त एकाच वेळी संवेदनशील परिमाणीकरण सक्षम करतात.
रिअल-टाइम पीसीआर आणि रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस पीसीआर एकच आहे का?
नाही, रिअल-टाइम पीसीआर आणि रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस पीसीआर एकसारखे नाहीत. मुख्य फरक असे आहेत:
रिअल-टाइम पीसीआर :
- डीएनए अनुक्रम वाढवते आणि त्यांचे प्रमाण वाढवते
- डीएनए ही सुरुवातीची अनुवांशिक सामग्री आहे.
रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस पीसीआर (आरटी-पीसीआर) :
- सीडीएनएमध्ये रूपांतरित झाल्यानंतर आरएनए अनुवांशिक सामग्री वाढवते
- आरएनए ही सुरुवातीची अनुवांशिक सामग्री आहे
रिअल-टाइम पीसीआरचा वापर बॅक्टेरिया, विषाणू इत्यादींमधून डीएनए अनुक्रम थेट शोधण्यासाठी आणि त्यांचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी केला जातो. रिअल-टाइममध्ये प्रत्येक चक्रात डीएनए प्रवर्धन मोजण्यासाठी ते फ्लोरोसेंट रंगांचा वापर करते.
आरटी-पीसीआर प्रथम रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस एन्झाइम वापरून आरएनएला पूरक डीएनए (सीडीएनए) मध्ये रूपांतरित करते. नंतर सीडीएनए सामान्य पीसीआरप्रमाणे वाढवला जातो. आरएनए वाढवून जनुक अभिव्यक्तीचा अभ्यास करण्यासाठी याचा वापर केला जातो.
दोन्ही तंत्रे प्रवर्धन आणि परिमाणीकरण करण्यास परवानगी देतात, परंतु रिअल-टाइम पीसीआर डीएनएसह कार्य करते आणि आरटी-पीसीआर प्रवर्धन करण्यापूर्वी आरएनएला सीडीएनएमध्ये रूपांतरित करते.
थोडक्यात, मध्यवर्ती फरक असा आहे की रिअल-टाइम पीसीआर डीएनए वाढवते तर आरटी-पीसीआर रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शननंतर सीडीएनएमध्ये आरएनए अनुक्रम वाढवते. डीएनए किंवा आरएनएच्या अभ्यासावर आधारित त्यांचे वेगवेगळे अनुप्रयोग आहेत.
रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पॉलिमरेज चेन रिअॅक्शन (RT-PCR) मध्ये समाविष्ट असलेले मुख्य टप्पे आहेत:
-
आरएनए निष्कर्षण : प्रथम, नमुन्यातून (पेशी, ऊती इत्यादी) आरएनए काढले जाते आणि शुद्ध केले जाते. चांगल्या दर्जाचे आरएनए अत्यंत महत्वाचे आहे.
-
रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन : काढलेले आरएनए नंतर रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस नावाच्या एन्झाइमद्वारे पूरक डीएनए (सीडीएनए) मध्ये रूपांतरित केले जाते.
-
सुरुवातीचे विकृतीकरण : दुहेरी-अडथळ्या असलेल्या डीएनएला एकाच धाग्यात वेगळे करण्यासाठी सीडीएनए नमुना गरम केला जातो.
-
प्रायमर्ससह पीसीआर प्रवर्धन : वारंवार थर्मल सायकलिंग केल्याने अनुक्रम विशिष्ट प्राइमर्स वापरून लक्ष्य सीडीएनए घातांकीयरित्या प्रवर्धन करण्यास मदत होते.
-
अंतिम विस्तार: अंतिम लांबलचक स्ट्रँड अभिकर्मक आणि इष्टतम तापमान पुरवून पूर्ण केले जातात.
-
व्हिज्युअलायझेशन : अॅम्प्लीफायड पीसीआर उत्पादने शेवटी अॅगारोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे क्वांटिटेशन आणि विश्लेषणापूर्वी पुष्टीकरणासाठी दृश्यमान केली जातात.
तर थोडक्यात, मुख्य टप्पे असे आहेत:
- आरएनए निष्कर्षण
- आरएनएचे सीडीएनएमध्ये रूपांतर
- लक्ष्य cDNA चे PCR प्रवर्धन
- दृश्यमान शोध आणि परिमाण
यामुळे आरटी-पीसीआर तंत्रज्ञानाचा वापर करून प्रथम सीडीएनए म्हणून प्रवर्धित करून आरएनएच्या अगदी लहान प्रमाणात देखील अभ्यास करता येतो.
प्रत्येक PCR, RT-PCR आणि qPCR वर कोणत्या सामान्य चाचण्या केल्या जातात?
पीसीआर, आरटी-पीसीआर आणि क्यूपीसीआर तंत्रांचा वापर करून केल्या जाणाऱ्या काही सामान्य चाचण्या येथे आहेत:
पीसीआर (पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन)
- रोगजनक शोधणे (जीवाणू, विषाणू)
- अनुवांशिक रोग चाचणी
- डीएनए फिंगरप्रिंटिंग/फॉरेन्सिक्स
- अनुवांशिक सुसंगतता चाचणी
- डीएनए बदल शोधणे
आरटी-पीसीआर (रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पीसीआर)
- जनुक अभिव्यक्ती प्रोफाइलिंग
- व्हायरल लोड शोधणे
- कर्करोग बायोमार्कर विश्लेषण
- मायक्रोआरएनए विश्लेषण
- विषाणूजन्य संसर्गाचे निदान
- आरएनए हस्तक्षेपाचे प्रमाणीकरण
qPCR (परिमाणात्मक PCR)
- व्हायरल लोडचे प्रमाणीकरण
- जीएमओ शोधणे/परिमाण निश्चित करणे
- जनुक अभिव्यक्ती पातळी विश्लेषण
- सूक्ष्मजीव शोधणे/परिमाण निश्चित करणे
- कॉपी नंबर व्हेरिएशन विश्लेषण
- सीडीएनए परिमाणीकरण
- बायोमार्कर प्रमाणीकरण
थोडक्यात, प्रवर्धनाची मूलभूत तंत्रज्ञान समान असली तरी, गरजेनुसार अचूक परिमाणात्मक विश्लेषण चाचण्यांऐवजी गुणात्मक तपासणीच्या वेगवेगळ्या प्रकारांमध्ये पीसीआर, आरटी-पीसीआर आणि क्यूपीसीआर वापरले जातात.
उच्च संवेदनशीलतेमुळे निदानापासून संशोधनापर्यंत - अनेक क्षेत्रांमध्ये सुधारित अचूकता आणि अचूकतेसाठी डीएनए/आरएनएच्या सूक्ष्म खुणा घातांकीयरित्या गुणाकार करता येतात.
निष्कर्ष
रोगजनक शोधण्यापासून ते अचूक औषधांपर्यंत, पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन (पीसीआर) आधारित जीनोमिक अॅम्प्लिफिकेशन तंत्रज्ञान विविध अनुप्रयोगांमध्ये डीएनए/आरएनए सिग्नेचर ओळखण्यात अतुलनीय संवेदनशीलता प्रदान करते - अगदी निदान चाचणीपासून ते अत्याधुनिक संशोधन क्षेत्रांपर्यंत. जरी घातांकीय अॅम्प्लिफिकेशनची मूलभूत तत्त्वे अपरिवर्तित राहिली असली तरी, अचूकता, वेग आणि परवडण्यावर लक्ष केंद्रित केलेल्या सतत नवोपक्रमांमुळे पीसीआर/आरटी-पीसीआर/क्यूपीसीआर आता आणि नजीकच्या भविष्यात आरोग्यसेवा आणि जीवन विज्ञान कार्यप्रवाहाचे अविभाज्य स्तंभ म्हणून स्थापित होतात.
अस्वीकरण
सर्व साहित्य कॉपीराइट आरोग्यसेवा आणि आजारी काळजी. वापराच्या
अटी आणि शर्ती आणि गोपनीयता धोरण लागू. या वेबसाइटवरील सामग्री केवळ माहितीच्या उद्देशाने आहे. वैद्यकीय स्थितीबद्दल तुमचे कोणतेही प्रश्न असल्यास नेहमी तुमच्या डॉक्टरांचा किंवा इतर पात्र आरोग्य प्रदात्यांचा सल्ला घ्या. आमची सामग्री विविध ऑनलाइन लेख आणि आमच्या स्वतःच्या ऑफलाइन अनुभवांनी प्रेरित आहे. हे आरोग्यसेवा आणि आजारी काळजीबद्दल ग्राहकांना जनजागृती आणि नियमित अपडेट प्रदान करण्यासाठी आहे.
© healthcare nt sickcare आणि healthcarentsickcare.com, २०१७-सध्या. या साइटच्या लेखक आणि/किंवा मालकाच्या स्पष्ट आणि लेखी परवानगीशिवाय या सामग्रीचा अनधिकृत वापर आणि/किंवा डुप्लिकेशन सक्त मनाई आहे. मूळ सामग्रीसाठी योग्य आणि विशिष्ट निर्देशांसह healthcare nt sickcare आणि
healthcarentsickcare.com ला पूर्ण आणि स्पष्ट क्रेडिट दिले गेले असेल तर उतारे आणि दुवे वापरले जाऊ शकतात.
